Estrogen receptor mRNA determined by Quantitative Real-Time PCR in the nasal mucosa of women taking oral contraceptives / Receptor ARNm de estrógeno determinado por PCR Cuantitativa en Tiempo Real en la mucosa nasal de mujeres tratadas con anticonceptivos orales

SUMMARY: Estrogen receptors (ER) have been identified in human nasal mucosa, but its physiologic and pathologic impacts are not totally established. ER have been demonstrated in nasal mucosa by several authors, mainly by immunohistochemical method in nasal mucosa samples surgically removed. The present study aimed to quantify ERα and ERβ mRNA concentration by using an absolute quantitative real-time PCR in cells from nasal mucosa smear of women under oral contraceptive therapy. Nasal epithelium smear samples were collected from 110 patients divided in two groups: 55 women who present regular menstrual cycle without using contraceptives and 55 women who present regular menstrual cycle and have been using oral contraceptives for more than 3 months. All the patients answered a rhinitis symptoms questionnaire. The current study showed the potential usefulness of nasal turbinate mucosa cell sourcing, collected through swab, for extracting useful RNA for gene expression. We have identified the predominant expression of ERα isoform in a ratio 10-15 times higher compared to ERβ isoform. There is a tendency for positive correlation between the ERb isoform and the rhinitis severity score.

RESUMEN: Se han identificado receptores de estrógeno (RE) en la mucosa nasal humana, sin embargo sus impactos fisiológicos y patológicos aún no están totalmente establecidos. Varios autores han demostrado RE en la mucosa nasal, principalmente por método inmunohistoquímico en muestras obtenidas quirúrgicamente. El presente estudio tuvo como objetivo cuantificar la concentración de ARNm de REa y REb mediante el uso de una PCR cuantitativa absoluta en tiempo real en células de frotis de mucosa nasal de mujeres bajo terapia anticonceptiva oral. Se recolectaron muestras de frotis de epitelio nasal de 110 pacientes divididas en dos grupos: 55 mujeres que presentan ciclo menstrual regular sin uso de anticonceptivos y 55 mujeres que presentan ciclo menstrual regular con uso de anticonceptivos orales durante más de 3 meses. Todas las pacientes respondieron un cuestionario de síntomas de rinitis. El estudio actual mostró la utilidad de la obtención de células de la mucosa de la concha nasal, recolectadas a través de un hisopo, para extraer ARN para la expresión génica. Hemos identificado la expresión predominante de la isoforma REμ en una proporción de 10 a 15 veces mayor en comparación con la isoforma REß. Hemos identificado la expresión predominante de la isoforma REα en una proporción de 10 a 15 veces mayor en comparación con la isoforma REß. Existe una tendencia a una correlación positiva entre la isoforma REß y la puntuación de gravedad de la rinitis.

Expresión de los receptores hormonales (RE/RP) y sobreexpresión de la proteína HER-2/neu en carcinoma ductal infiltrante / The susceptibility to infection by Leishmania panamensis and the sensitivity to drugs differ according to the macrophage type

Introducción: El grado de diferenciación tumoral, la expresión de los receptores de estrógeno y progesterona y la sobreexpresión de la proteína HER-2/neu son factores de tipo pronóstico y predictivo importantes en la evolución y conducta terapéutica del carcinoma mamario infiltrante. Se ha encontrado en diversos estudios que los inmunofenotipos que no expresan los receptores hormonales o que sobre expresan la proteína HER-2/neu se asocian con pobre diferenciación tumoral. Objetivo: Determinar el perfil inmunofenotípico del carcinoma ductal infiltrante y establecer su relación con el grado de diferenciación tumoral. Metodología: Usando técnicas de inmunohistoquímica se determinaron los receptores de estrógeno (RE) y progesterona (RP), y la sobreexpresión de la proteína HER-2/neu en muestras de carcinoma ductal infiltrante y se identificaron sus fenotipos basados en la clasificación de Cheang. La variedad histológica y el grado de diferenciación tumoral en los carcinomas ductales infiltrantes fueron evaluados en tejido coloreado con hematoxilina-eosina. Resultados: Se incluyeron las muestras de 58 pacientes con carcinoma ductal infiltrante. El 15,5% de los carcinomas eran bien diferenciados, 63,8% moderadamente diferenciados y el 20,7% restante pobremente diferenciados. El inmunofenotipo triple negativo se presentó en 29,3% de las muestras, HER2+ en el 20,7%, luminal/ HER2+ en el 1,7%, luminal A en el 43,1% y ER-/PR+/HER2- en el 5,2%. Conclusión: En nuestro estudio, no se encontró asociación entre el grado de diferenciación tumoral y los inmunofenotipos. Salud UIS 2011; 43 (2): 149-158.

Introduction: The degree of tumor differentiation, the expression of estrogen and progesterone receptors and HER-2/ neu protein overexpressing are important prognostic and predictive factors in the evolution and therapeutic management of invasive breast carcinoma. In different studies were found that the immunophenotypes that do not express hormonal receptors or the HER-2/neu protein overexpressing have been associated with poor tumor differentiation. Purpose: To determine the immunophenotypic profile of invasive ductal carcinoma and establish its relationship with the histological grade. Methodology: Using immunohistochemistry were determined the estrogen receptor (ER) and progesterone (PR) and HER-2/neu protein overexpression in invasive ductal carcinoma samples and their phenotypes were identified based on classification of Cheang. The histological subtype and degree of tumor differentiation in invasive ductal carcinomas were evaluated in tissue stained with hematoxylin-eosin. Results: In this study were included 58 patients with invasive ductal carcinoma. 15.5% of the carcinomas were well differentiated, 63.8% moderately differentiated and the remaining 20.7% poorly differentiated. The triple-negative immunophenotype was show in 29.3% of the samples, HER2+ in the 20.7%, luminal/HER2 + in the 1.7%, luminal A in the 43.1% and the phenotype (ER-/PR+/HER2) in the 5.2%. Conclusion: In this study don't was found association between the degree of tumor differentiation and the immunophenotypes. Salud UIS 2011; 43 (2): 149-158.

Inmunohistoquímica y expresión de receptores de estrógenos y progesterona en neoplasias mamarias malignas caninas en distintos estadios clínicos / Immunohistochemistry and expression of estrogen and progesterone receptors in canine malignant mammary tumors in different clinical stages

La técnica de inmunohistoquímica descrita por Walker y col. (1998) y Mote y col. (2001) es de utilidad para la determinación de receptores de estrógenos y de progesterona en tumores mamarios de la hembra canina. Existe bastante controversia respecto al porcentaje de receptores de estrógenos y de progesterona, con valor pronóstico o predictivo en tumores malignos caninos debido, muy probablemente, a la falta de uniformidad en criterios de inclusión de los casos en los estudios realizados. El presente trabajo se realizó en una población de 51 perras. Los tumores fueron escindidos quirúrgicamente mediante mastectomía de las glándulas afectadas. Para la determinación de receptores hormonales, se analizó la muestra con mayores características histológicas de malignidad de cada animal. Se contabilizó el porcentaje de células tumorales positivas para cada uno de los receptores (receptor de estrógeno alfa, receptor de estrógeno beta y receptores de progesterona) en los distintos estadios clínicos (I, II, II, IV). Se consideró positivo todo corte ³ 20% de células tumorales positivas para cada uno de los receptores. Se realizó una estadística descriptiva (media y error estándar) con los animales positivos para cada uno de los receptores en los distintos estadios clínicos. En línea con reportes de otros autores, más de la mitad de caninos portadores de tumores mamarios malignos expresaron receptores de estrógenos y de progesterona. Conociendo que el comportamiento biológico de una neoplasia varía con el estadio clínico del paciente, resulta interesante estudiar la expresión de los receptores en cada uno de éstos, en animales con neoplasias mamarias malignas. Adicionalmente, a este objetivo incluye la puesta a punto la de técnica de inmunohistoquímica para la determinación de receptores hormonales en la especie.

receptors in canine mammary tumors. There is considerable controversy regarding the percentage of estrogen and progesterone receptors that having prognostic or predictive value in malignant tumors in dogs because, most likely, the lack of uniform criteria for inclusion of cases. This study was conducted in a population of 51 female dogs. The tumors were surgically treated by mastectomy of the affected glands. For the determination of hormone receptors, the sample analyzed was showed higher histological malignancy features of each animal. It was counted the percentage of tumor cells positive for each of the receptors (estrogen receptor alpha, estrogen receptor beta and progesterone receptor) in animals in various clinical stages (I, II, III, IV). It was considered positive cut-off ³ 20% tumor cells positive for each of the recipients. It was conducted a descriptive statistics (mean and standard error) which positive animals for each of the receptors in different clinical stages. In line with reports of other authors, more than half of canine carriers of malignant mammary tumors expressed estrogen and progesterone receptors. Knowing that the biological behavior of cancer varies with the clinical stage of the animal, objective was to study the expression of receptors in each of the clinical stages in animals with malignant mammary tumors. Additionally, this includes the preparation of the immunohistochemical technique for the determination of hormone receptors in this species.

Carcinomas invasores triples negativos de la glándula mamaria: incidencia y características clínico patológicas / Triple negative invasive breast carcinoma: incidence and clinical pathological characteristics

El comportamiento epidemiológico de los tumores malignos del país ha presentado un cambio en los últimos años; el cáncer de mama ha aumentado su incidencia hasta colocarse como el segundo tumor maligno más frecuente en la mujer y el primero en mortalidad. Este tipo de tumor tiene características que se pueden estudiar con las técnicas de inmunohistoquímica, como son la expresión de receptores en las células neoplásicas (estrógenos, progesterona y el HER2 o receptor 2 del factor de crecimiento epidérmico humano). Loscarcinomas que no expresan ninguno de estos tres receptores tienen un peor pronóstico. El estudio tiene como objetivos conocer las principales características de este grupo de tumoresdenominados triples negativos, y determinar su relevancia dentro del grupo total del carcinomade mama. Materiales y métodos: Se recolectaron los casos diagnosticados de cáncer de mama en mujeres, en el periodo comprendido entre el 1 de enero y el 31 de diciembre de 2006, en el Hospital San Juan de Dios, en el Servicio de Patología, que dispusieran de estudios inmunohistoquímicos. Se consideró la información acerca de la edad de las pacientes, así como el tipo histológico y grado de diferenciación de cada uno de los tumores. Se separó el grupo correspondiente a los tumores triple negativo y se realizaron los análisis estadísticos por medio del programa Epi Info 3.3.4. Resultados: De una población de 221 pacientes diagnosticadas con cáncer de mama en el periodo mencionado, se presentaron 40 pacientes con cáncer de mama triple negativo, resultando en una incidencia de un 18% (I.C. 95%, 12,79 - 23,40) y una edad promedio de 54 años (I.C.95%, 50 - 59), con una mediana de 52 y una moda de 48. El cáncer de mama triple negativo tuvo una relación mayor con el tipo histológico ductal infiltrante, con un 67,5% (I.C. 95%, 51,73- 83,26); seguido por el lobulillar infiltrante, con un 12,5% (I.C.95%, 4,18 - 26,80); el medular conun 5% (I.C. 95%, 0,61 - 16,92)...

The epidemiological behavior of malignant tumors in our country has undergone an important change during the last years, Breast carcinoma has increased its incidence, occupyingthe second place in malignancies in women and the first one in mortality. This type of tumor has characteristic features from the immunohistochemistry, standpoint since they can express different receptors such as estrogens, progesterone and HER2 or receptor 2 of epidermal humangrowth factor. It is known that carcinomas that do not express any of these 3 receptors have worse prognosis. Our objective is to define the main characteristics of the so called triple negative tumors and determine their rol within the total group of breast carcinomas. Methodology: All cases of breast cancer seen at the Pathology Department of the Hospital San Juan de Dios, from January 1 to December 31, of 2006 were included if they hadimmunohistochemistry studies. The age of the patient;s, and the histological type and degree of differentiation of each one of the tumors was recorded. The triple negative group was separatedand an statistical analyses was undertaken utilizing the Epi Info 3.3.4 program. Results: Of 221 patients diagnosed with breast carcinomas, 40 patients were identified as triplenegative cancer, giving an incidence of 18% (I.C. 95%, 12,79 - 23,40), they had an average ageof 54 years (I.C. 95%, 50 - 58 ) with a median of 52 and mode of 48. Likewise, triple-negative cancer individuals were more related with ductal infiltratiing: 67,5% (I.C. 95%, 51,73-83,26),followed by unfiltrating lobular:12,5% (I.C.95%, 4,18 - 26,80), medular, 5 % and with other such as papillary Regarding the degree of differentiation, 23 cases were III degree, 8 were II degree, and 3 were I degree. Conclusion: Triple-negative breast cancers affect young women, are of higher histological grade...

Detección de receptores de estrógeno, progesterona y de proteína ligadora de corticosteroides en el tracto genital de hembras caninas (Cannis familiaris): estudio inmunohistoquímico / Detection of estrogen, progestorone receptors and corticosteroid binding globulin in the canine (Cannis familiaris) reproductive female tract: immunohistochemistry study

Los receptores esteroidales sexuales del tracto genital de la hembra tienen importancia dado que, a través de ellos, actúan las hormonas responsables de su desarrollo y de sus cambios morfofuncionales. En su mecanismo, uno de los factores a considerar son las posibles diferencias entre las distintas especies. El objetivo del presente estudio fue evaluar, en la especie canina (N=8), la presencia de receptores de estrógenos (RE), progesterona (RP) y la presencia de proteína ligadora de corticosteroides (CBG) en ovario, oviducto y útero de 3 hembras prepúberes (N=3) y 5 hembras adultas (N=5). La evaluación morfológica se realizó con tinción de hematoxilina-eosina (H-E) e inmunocitoquímica, según la técnica de Stemberger (1979). Los resultados revelaron en animales ciclando, inmunorreactividad (IR) positiva, RE en útero, oviducto y ovario siendo marcada en oviducto. La IR para RP fue leve y varió según el estadio del ciclo. En hembras prepúberes, los RE y RP no fueron evidenciados. La CBG mostró positividad en el tracto durante el ciclo y fue negativa en prepúberes. Se concluye que la presencia de RE y RP es detectable en útero, oviducto y ovario de la hembra canina adulta habiendo variaciones de concentración según el estadio del ciclo estral, siendo su presencia en las prepúberes no evidenciables, a diferencia de otras especies (oveja), donde son detectables en este estadio del desarrollo. La presencia de CBG constante durante el ciclo estral y variable en los otros estadios indica su posible participación en los procesos reproductivos.

The sexual steroid receptors of the genital tract of the female have significant importance since though them the hormones responsible acting. In their mechanism one of the factors to be kept in mind is the possible differences among the diverse species, the objective of this study was to evaluate in canine (N= 8) the presence of receptors of estrogens (ER), progesterone (PR) and the presence of corticosteroid binding globuline (CBG) in ovaries, oviduct and uterus of prepuberal female (N=.3) and matures: (N=5) It was used H-E and immunohistochemical study according to the technique of Stenberger (1979). The results during the oestrus showed: Immune reactivity (IR) positive, ER in uterus and ovary being much stronger in oviduct. The PR varied according the stage of oestrus cycle. In puberal female dog ER and PR were undetectable. The CBG revealed positive in reproductive tract of cycling females but negative in prepubertal. It was concluded that the presence of ER and PR are detectable in uterus, oviduct and ovary of mature female dogs varying their concentration according to the cycle. In prepuberal, its presences come undetectable differing from other species (ovine), in which they are detected at this stage of development. The constant of CBG presence during oeustrus cycle and such variation in other stages of the cycle, it might suggest its participation in the several reproductive activities.

Presencia de cbg (corticosteroid binding globulin) y receptores de estrógeno (fracción alfa) y progesterona en el sistema reproductor de ovejas en distintos estadios del ciclo reproductivo. Estudio inmunohistoquímico / Presence of CBG (Corticosteroid binding globulin) Estrogen Receptors Alpha and Progesterone Receptors Along the Reproductive Tract in Sheep During Different Stages of the Reproductive Cycle. Inmunohistochemestry Study

Las hormonas esteroidales sexuales actúan a través de sus receptores permitiendo el desarrollo del tracto genital y determinando su estado morfofuncional. El objetivo del presente estudio fue estudiar la presencia de CBG (corticosteroid binding globulin) y de los receptores de estrógenos alfa y progesterona en el útero, oviducto y ovario de ovejas cíclicas (n = 3), gestantes (n = 3), y en anestro (n = 3). La evaluación morfológica se realizó con tinción de hematoxilina - eosina (H-E) e inmunohistoquímica, según técnica de Sternberger. Los resultados revelaron para receptores de estrógenos en oveja cíclicas, inmunorreactividad positiva moderada en el epitelio glandular y estroma endometrial y en epitelio superficial y corión de la mucosa oviductal; siendo la inmunorreactividad leve en ovejas gestantes y anéstricas. Los receptores de progesterona mostraron en los 3 órganos inmunorreactividad positiva moderada en ovejas cíclicas e inmunorreactividad leve o negativa en animales acíclicos. La inmunorreactividad para CBG en endometrio fue marcada en ovejas cíclicas, y leves o negativa en gestantes y anéstricas. En ovario se observó en ovejas durante el ciclo, reacción inmunopositiva a la CBG en células foliculares, en el fluido folicular y en células estromales llenas de material granular inmunopositivo dispuestas en forma grupal o aislada. Se concluye que la presencia de los receptores de estrógenos alfa y de progesterona es siempre detectable en útero, oviducto y ovario variando su concentración según el estadio. La presencia de CBG fue constante en los tres órganos durante el ciclo estral y variable en los otros estadios, siendo su participación dentro del proceso reproductivo tema de próximos estudios.

The steroids hormones operate through their receptors in the development of the genital tract and determine it morphofuncional state. The objective of the present study was to investigate the presence of CBG (corticosteroid binding globulin), estrogens alpha and progesterone receptors in the uterus, oviduct and ovary of sheep during oestrous cycle (n = 3), pregnancy (n = 3), and in anoestrous (n = 3). Cross sections were stained with Hematoxylin-eosin and Inmunohistochemical (ICQ) study was made according to the technique of Sternberger. The results showed for estrogens receptors in sheep on cycle estral, moderate positive immunoreaction in the estroma and on the epithelial cells of endometrial glands and in oviductal superficial epithelium and estroma; the immunoreaction in pregnant and anestrics sheep was low. The progesterone receptors had in the 3 organs moderate immunorreactivity in cycling sheep and immunorreactivity low or negative in acycling animals. The CBG endometrial immunorreaction was high in cycling sheep and low or negative in pregnant and anestrics. The CBG in sheep during the cycle demonstrated a positive reaction at ovarian level in follicular cells, inside follicular liquid, and in stromal cells filled with granulate material disseminated in groups or isolated. In conclusion, the presence of estrogens alpha and progesterone receptors are always detectable in uterus, oviduct and ovary varying their concentration according to the stage The presence of CBG was constant in the three organs during the oestral cycle and variable in the other stages, its participation in the reproductive process is topic for next studies.

Presencia de Receptores de Estrógenos y de Progesterona en el Endometrio de Ovejas Prepúberes: Estudio Inmunocitoquímico / Presence of Estrogen and Progesterone Receptors in Endometrium of Prepubertal Sheeps: Immunocitochemistry Study

Los receptores esteroidales endometriales tienen un papel esencial en la fisiología reproductiva, siendo ellos determinantes del estado morfuncional del tracto genital y especialmente del endometrio en el cual se implantará el embrión. Se estudió la presencia de receptores de estrógenos y progesterona en el endometrio de ovejas Rommey Marsh prepúberes (n= 3). Se obtuvieron muestrasde pared uterina para estudios histológico e inmunocitoquímico.El endometrio de la oveja prepúber muestra histológicamente carúnculas, áreas aglandulares de estroma denso rico en fibroblastos que se convertirán en puntos de inserción placentaria durante la gestación y áreas intercarunculares constituidas por endometrio glandular proliferativo de estroma compacto y vasos poco prominentes. La inmunocitoquímica reveló, para los receptores de estrógenos, inmumnoreactividad positiva moderada en el estroma endometrial ymuy aisladamente en el epitelio glandular,noencontrándose diferencias entre zona caruncular e intercaruncular. Losreceptores de progesteronapresentaron positividad estromal siendo algo más intensa en la zona intercaruncular. Concluimos que la oveja Rommey Marsh presentareceptores de estrógenos y progesterona fisiológicamente activos en su endometrio ya en etapa prepúber, o sea, antes de comenzar sus ciclos ováricos, los que podrían ser inducidos y regulados por hormonas exógenas, con el fin de aumentar la eficiencia y prevenir disfunciones reproductivas.

The endometrial esteroid receptors play an essential paper in the reproductive physiology being them decisive on the morophuncional state of the genital tract and especially of the endometrium in which the embryo will be implanted. We studied the presence of estrogens and progesterone receptors in the endometrium of Rommey Marsh prepubertal sheep (n=3) samples of uterine wall were obtained for histologycal and and Inmunocitochemestry study. The endometrium of the prepubertal sheep shows histologycaly caruncles, aglandulares areas of dense estroma rich in fibroblastos, that will become points of placental insertation during the gestation and intercarunculares areas constituted by endometrium glandular proliferative of compact estroma and not very prominent vessels. The Inmunocitochemestry revealed for the estrogens receptors inmumnoreactivity positive moderated in the estroma endometrial and very scattered in the glandular epithelium, not being differences between area caruncular and intercaruncular. The progesterone receptors presented positive inmunoreactivity estromal being more intense in the intercaruncular area We conclude that the sheep Rommey Marsh shows estrogens and progesterone receptors physiologically active in its endometrium already in prepubertal stage this is before beginning its ovarian cycles, those could be induced and regulated by exogenous hormones with the purpose of to increase the efficiency and to prevent reproductive disfunctiones.

Correlación entre distintos tipos histológicos de cáncer de mama y receptores estrogénicos / Correlation between different histological types of breast cancer and estrogen receptors

Se presentan los resultados de 140 muestras histológicas tomadas en pacientes con cáncer de mama para determinar su concentración de receptores de estrógenos. Destaca la importancia, frecuencia de positividad para receptores de estrógenos en todos los tipos histológicos.

We've analized the resuls from 140 histologic samples taken to patients with breast cancer in order to find its concentration of estrogen receptors. We notice a high frecuency of positive indexes for estrogen receptors in all histologic types.